【作者】 王建华；

【导师】 张朝贤；

【作者基本信息】 中国农业科学院 ， 农药学， 2002， 硕士

【摘要】 我们从中国农业大学杂草室获得了17株特异感染稗草(Echinochloa crus-galli)的病原菌，该菌是从13个不同生态区域的稗草植株的叶片病斑上分离得到的，经鉴定为尖角突脐孢菌(Exserohilum monoceras)。本论文旨在为其开发成新型生物农药—微生物除草剂作致病机理和应用前景的基础研究，主要研究了其侵染过程、致病性和致病毒素。我们通过对其侵染规律和无孢子悬液对稗草毒害的测定，提出尖角突脐孢产生毒素和有开发为毒素除草剂的可能；并选择生物测定的合适方法，从17个菌株中筛选出合适的产生毒素的菌株32、X27、MC9；进一步选用菌株32研究产生毒素的最佳条件，这些为毒素的制备和机理研究提供了基础。 研究表明尖角突脐孢是稗草的强致病菌。该菌不仅能从稗草叶片的气孔或伤口侵入，而且能直接穿透叶片表皮细胞侵入叶肉细胞，接种后24—26小时完成侵染过程。被侵染后的稗草植株叶肉细胞膜结构发生变形，叶绿体迅速失绿，后期膜被破坏，提示尖角突脐孢在侵染过程中有可能分泌毒素，并作用于细胞膜。 对17株菌株的生测结果表明，种子萌发抑制法和根生长抑制法是比较理想的生测方法，而离体叶片检测会得到比较直观的结果，但不能定量，根冠细胞测定法，喷雾法不适用于检测毒素的致病性。 用1×10~6／ml孢子浓度处理稗草植株，14天后调查各菌株对稗草植株的抑制情况，得出尖角突脐孢的强致病菌株是X27、MC9和32。对17株菌滤液的生物测定结果综合分析，这17株菌都或多或少的产生致病毒素，以MC9、32、X27、PX52、PX2最为有效，说明分生孢子的致病性和毒素的作用之间有正相关性，综合分析，我们选定进一步研究的适宜菌株为活力最高的MC9、32、X27。 选用尖角突脐孢菌32，研究了其产生毒素的最优条件为：在土豆液体培养基上，起始pH5.5—6，接种量10~4个孢子，培养温度28℃，摇床培养200rpm，培养时间7天。我们分析了毒素产生条件与菌和孢子培养条件的相关性，说明毒素的产生是与菌株的生长活性相一致的，在一定程度上有量的积累，但二者之间也有差异。更多还原

【Abstract】 Seventeen strains of Exserohilum monoceras isolated from the diseased leaves of Echinochloa curs-galli occurring in thirteen different places were gained. The objects of this study were to determine its infection process, pathological characters and toxins. We observed the infection process and lesions on leaves of E. crus-galli damaged by filtrate of E. monoceras, and concluded it may produce toxins; we compared the bioassay methods to select the strains 32, X27 and MC9 which could produce vast toxins; We determined conditions of toxins production of strain 32.The infection process showed that E. monoceras had high pathological action on E. crus-galli. The hypha began to form from the base point of the conidia 8 hours after inoculation. Penetration into E. crus-galli leaves by the hypha occurred through the stomata or randomized places 13 hours after inoculation. The whole infection process finished within 48 to 72 hours.We compared the different bioassay methods and found that the root and shoot growth control experiment was most optional. Strain 32, MC9, X27 had the highest control rate.For toxin production, the optimal conditions were: PGB liquid media, initial pH 5.5-6.0, initial inoculation 104 conidia/ml, temperature 28癈, 200rpm, seven days. The toxin productions was related to the conditions of mycelium growth.更多还原