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河南省烟草马铃薯Y病毒体外特性及血清学检测技术的研究
Characteristics in Vitro of PVY Isolated from Tobacco in Henan Province and Serological Detection Method
【作者】 秦艳红;
【作者基本信息】 河南农业大学 , 植物病理学, 2004, 硕士
【摘要】 用生物学方法研究了河南省PVY的体外特性,结果表明:河南省PVY的稀释限点为10-6~10-7,致死温度为70~75℃,体外存活期为4~6d。体外存活期与原报道相符,稀释限点与致死温度均比已有报道要高。对PVY、CMV和TMV三者之间的相互作用进行了研究,结果表明,每两种病毒的混合侵染都会加重对寄主植物的危害,并且症状表现存在差别。分别以三生烟和普通烟为繁殖材料,采用蔗糖垫超速离心法提纯病毒,结果表明病毒提纯物最大吸收峰在260nm处,最低吸收峰在250nm处,OD280/260分别为:三生烟0.840873,普通烟0.837676,提纯物显示出典型的病毒核蛋白体光谱吸收特征。比较了ACP-ELISA和DAS-ELISA两种检测方法,结果前者比后者灵敏性好。对ACP-ELISA方法进一步的优化结果表明,样品最佳稀释倍数为5倍,最佳孵育时间为10h,一抗和二抗的最佳孵育时间分别为8h和4℃过夜,是比较理想的优化ACP-ELISA检测方法。我们利用优化的ACP-ELISA检测技术,对PVY在河南省主要产烟区的分布及危害情况、PVY在病残体中的存活时间、病株上采收的种子、田间及田边的作物和杂草进行了研究。对在三大类症状表现所采病样分别用ACP-ELISA法检测其PVY携带情况。⑴表现为全株均有叶脉坏死症状,叶背面支脉变褐坏死,叶片出现疱斑,皱缩。检测PVY阳性率为100%。⑵症状表现为上部叶表现花叶症状,中下部<WP=10>叶片有坏死、蚀刻纹症状。检测PVY阳性率为66.7%。⑶症状表现为混合型,上部叶表现花叶,下部叶表现橡叶纹。检测PVY阳性率为50%。说明PVY在河南省主要产烟区的发生非常普遍而严重。PVY在病残体中的存活时间较长为110d,很有可能成为下一年的初侵染来源;经ACP-ELISA检测,烟田及田边的作物和杂草,如红薯、稗草、苋色藜、龙葵等均不带毒,病株上采收的种子带毒。通过这些研究将有利于我们有针对性的制定防治措施,为开展PVY的防治工作提供理论依据。
【Abstract】