【作者】 韩福新；

【导师】 郭东生；

【作者基本信息】 华中科技大学 ， 神经外科， 2011， 硕士

【摘要】 目的通过体外EGF作用于下调LRIG1后的GL15细胞,探讨LRIG1表达下调对p-EGFR蛋白,p-Akt蛋白和p-ERK蛋白表达的影响。方法GL15细胞经转染LRIG1-shRNA质粒后,Western Blot检测LRIG1蛋白表达的状况。在含有G418的DMEM培养基中培养经稳定转染LRIG1-shRNA的GL15细胞,经表皮生长因子(EGF)100ng/ml体外刺激后,Western Blot检测p-EGFR,p-AKT和p-ERK表达水平随时间的效应变化。结果Westemblot结果显示:GL15细胞转染LRIG1-shRNA质粒后,LRIG1表达较对照组降低52.32%,P<0.01有统计学差异。用EGF刺激转染了LRIG1-shRNA质粒GL15细胞,在0min时,实验组p-Akt表达较对照组升高25.12% ,P<0.01有统计学差异;在5min时,实验组p-EGFR和实验组p-Akt表达较对照组分别升高343.92%,27.34%,P<0.01有统计学差异;在30min时,实验组p-EGFR和实验组p-AKT表达较对照组分别升高70.94%,29.39%,P<0.01有统计学差异;用EGF刺激转染了LRIG1-shRNA质粒GL15细胞,在0分钟,5分钟和30分钟的时候,实验组p-ERK表达较对照组无明显变化,数据统计P>0.05无统计学差异。结论GL15细胞经转染LRIG1-shRNA质粒后,LRIG1蛋白表达降低;用EGF刺激转染了LRIG1-shRNA质粒的和转染了pGenesil2-negative shRNA质粒的GL15细胞,前者细胞中的p-EGFR蛋白和p-AKT蛋白表达水平显著增加,而p-ERK蛋白的表达无明显变化。因此,LRIG1对p-EGFR/Akt这一信号通路存在较明显的调控作用,然而,对EGFR信号通路中的ERK通路无明显影响。更多还原

【Abstract】 Objective Inhibition of LRIG1 gene affects the levels of p-EGFR, p-Akt and p-ERK protein of the transfected GL15 cell line.Methods The transfected GL15 cell were cultured in medium containing G418. After EGF (100ng/ml) stimulated the cell, the levels of p-EGFR, p-Akt and p-ERK protein were detected with Western Blotting.Results The levels of p-EGFR and p-Akt protein rised after 5 minutes and 30 minutes of EGF stimulation, but the protein levels of p-ERK weren’t changed significantly. Conclusion EGF raised the levels of p-EGFR, p-Akt protein of the transfected GL15 cell line, but don’t changed the level of p-ERK protein.更多还原