【作者】 夏鹏；

【导师】 裴钢；

【作者基本信息】 中国科学院研究生院（上海生命科学研究院） ， 细胞生物学， 2006， 博士

【摘要】 谷氨酸转运蛋白在调节突触间隙内的谷氨酸的时空分布上起重要的作用,它防止由于胞外过高的谷氨酸浓度而给细胞带来的毒害作用。兴奋性氨基酸转运蛋白EAAC1是神经元特异性的,它参与调节突触间隙的谷氨酸浓度。阿片受体在大脑中参与谷氨酸能神经系统的调节,但是具体的机制仍需要进行进一步研究。本文报道了在非洲爪蟾卵母细胞中delta阿片受体(DOR)与EAAC1的共表达可以下调EAAC1的功能,而mu阿片受体的共表达并不影响EAAC1的功能。EAAC1由于DOR的表达而导致的下降功能可通过DPDPE激活DOR受体而得到抵消。用生物素标记膜上受体的实验结果显示这种DOR对EAAC1功能的调节并不改变胞内和膜上的EAAC1表达量。从卵母细胞和大鼠海马神经细胞得到的免疫共沉淀和免疫荧光的结果均显示EAAC1和DOR两种蛋白存在共定位,这表明二者之间存在直接的相互作用。与EAAC1功能实验一致的是DPDPE激活DOR会减弱他们之间的相互作用。我们的结果提示delta阿片受体可以通过蛋白-蛋白间的相互作用来调节EAAC1的功能,而DOR的激活可以释放这种相互作用导致的抑制作用。我们认为这个机制可能在阿片处理后的谷氨酸能神经系统的调节中发挥重要作用。更多还原

【Abstract】 Glutamate transporters play an essential role in regulating temporal and spatialglutamate concentration in synaptic cleft. The excitatory amino acid carrier 1(EAAC1), which is a neuronal specific transporter, regulates the synaptic glutamateconcentration. Opioid receptors are found to modulate the glutamatergic system inbrain, but the regulatory mechanism remains to be investigated. Here we report thatthe δ-opioid receptor (DOR) co-expressed with EAAC1 in Xenopus oocytes, but notthe μ-opioid receptor, down-regulates EAAC1 function, and that DPDPE stimulationof DOR can counteract the down regulation of the EAAC1-mediated uptake. Resultsfrom co-immunoprecipitation and immunofluorescence microscopy in both oocytesand rat hippocampal neurons indicate co-localization and suggest direct interactionbetween DOR and EAAC1, and this interaction reduce after DOR receptoractivation.Our results suggest that the delta opioid receptor can modulate EAAC1function by direct protein-protein interaction and that activation of DOR releases theinhibitory interaction. We suggest that this mechanism may be important formodulation of the glutamatergic system after opioid stimulation.更多还原